Etude de formulations intraveineuses d'amphotericine B avec des agents tensioactifs dérivés ou non du cholesterol
(1991)
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- L’amphotéricine B reste un médicament de choix dans le traitement des mycoses systémiques malgré deux handicaps majeurs : des effets indésirables pouvant contraindre à l’interruption du traitement et une insolubilité dans l’eau qui impose le recours à sa solubilisation colloïdale pour l’administration par voie intraveineuse. De se point de vue, l’emploi d’une solution micellaire d’amphotéricine avec du déoxycholate de sodium est généralisée depuis son introduction en clinique (Fungizone®). <BR> Les stérols sont généralement reconnus comme les cibles de l’amphotéricine tant pour expliquer l’activité antifongique (liaison à l’ergostérol) que la toxicité (liaison au cholestérol membranaire). Une surfactif dérivé polyoxyéthylénique du cholestérol avait été présenté comme diminuant la toxicité de l’amphotéricine B par inhibition compétitive de ce tensioactif. Dans ce but, nous avons comparé les effets de ce surfactif à ceux de tensioactifs analogues dérivés du polyoxyéthylèneglycol et ne contenant pas de cholestérol dans leur structure. <BR> Dans un premier temps, nous avons recherche de nouvelles formulation hydrosolubles de l’amphotéricine B. nous avons sélectionné des agents tensioactifs solubilisant l’antibiotique et nous avons mis en évidence des structures de surfactifs favorables à cette solubilisation. Dans le cas du polyoxyéthylèneglycol cholestérol (Solulan C24), une structure de niosomes a été observée. Ce ne fut pas la cas pour les solutions d’amphotéricine avec le stéarate de polyoéthylèneglycol (100) (Myrj59) ou avec l’éther polyoxyéthylénique (50 d’alcool gras (C13-C11) (Synperonic A50). <BR> Afin d’évaluer l’éventuel pouvoir protecteur de ces tensioactifs, nous avons examiné l’activité lytique des associations de l’antibiotique avec les surfactifs sur de érythrocytes et des hépatocytes isolés. Cette étude a montré que la protection varie selon le produit et est maximale pour un rapport déterminé entre les concentrations de surfactif et d’amphotéricine B. Le Myrj 59 abolit l’activité hémolytique de la Fungizone au même titre que le polyoxyéthylèneglycol cholestérol. Le synperonic A50, par contre, ne protège que partiellement de l’hémolyse. <BR> L’effet protecteur apparait à une concentration voisine de la concentration micellaire critique et aux concentrations où ils diminuent l’activité hémolytique de la Fungizone, ces trois surfactifs augmentent la résistance des globules rouges à la lyse. Nous devons souligner qu’aux mêmes concentrations optimales qui protégeaient contre l’hémolyse induite par l’amphotéricine B, les surfactifs diminuent la fixation de l’antibiotique sur les membranes de lymphocytes de souris. Si cette diminution n’est jamais totale, elle est toutefois plus importante dans le cas des deux surfactifs qui supprimaient l’hémolyse. Selon Bolard, les molécules d’amphotéricine B augmentent la perméabilité membranaire des cellules de mammifères quand elles se trouvent sous une forme agrégée. Cependant, les résultats ont montré qu’une dissociation des agrégats ne survient qu’à des concentrations en tensioactifs supérieures aux rapports optimaux déterminés dans les tests d’hémolyse. Selin Gruda, un surfactif non ionique peut inhiber la toxicité cellulaire dans la mesure où il diminue l’interaction de l’amphotéricine avec le cholestérol. L’analyse des spectres UV/visible montre que les trois tensioactifs inhibent, en milieu n-propanol-eau, l’interaction de l’amphotéricine avec le cholestérol. <BR> Nous avons également voulu vérifier si les associations de l’amphotéricine B avec les agents tensioactifs pouvaient modifier la toxicité de l’antifongique in vivo. <BR> L’association du polyoxyéthylèneglycol cholestérol à l’amphotéricine B augmente près de deux fois la DL50 tandis que Myrj 59 ne la modifie pas. Faut-il attribuer cette différence à la structure d’un dérivé du cholestérol ou à la présence de niosomes ? Tirer une déduction de ce seul paramètre en l’isolant d’une étude toxicologique plus complète serait téméraire. <BR> L’augmentation observée de la DL50 est en tout cas étrangère à une diminution de la toxicité rénale. L’étude de la néphrotoxicité des associations d’amphotéricine chez le rat a en effet mis en évidence une discordance avec les résultats de la DL50. suite à des injections intrapéritonéales répétées, l’association au Myrj 59 est apparue moins néphrotoxique que le Fungizone alors que l’amphotéricine est plus néphrotoxique lorsqu’elle est associée au polyoxyéthylèneglycol cholestérol ou au Synperonic A50. La plus grande néphrotoxicité de l’association au dérivé du cholestérol peut être expliquée par la toxicité intrinsèque du surfactif, alors que dans le cas du Synperonic A50, elle peut être la conséquence de taux sériques en amphotéricine B plus élevés. Les agents tensioactifs non ioniques ne diminuent pas l’activité antifongique du l’amphotéricine in vitro et in vivo. <BR> En conclusion, différents agents tensioactifs non ioniques dérivés du polyoxyéthylèneglycol peuvent solubiliser l’amphotéricine B dans l’eau et modifier sa toxicité sans en diminuer l’activité antifongique. Dans cette étude, l’hypothèse du cholestérol ne s’est pas vérifiée : la présence du cholestérol dans la structure du tensioactif ne semble pas l’élément déterminant pour diminuer la toxicité de l’amphotéricine B par contre, l’association de l’antibiotique au Myrj 59 s’est montrée moins hémolytique et moins néphrotoxique que la Fungizone. Elle pourrait dès lors s’avérer être une formulation préférable à la préparation commerciale. Elle mériterait des expérimentations complémentaires afin de confirmer ces premiers résultats sur d’autres modèles et d’expliquer le mécanisme de protection de la fonction rénale. Beaucoup d’inconnues subsistent : la tolérance de cette association par voie intraveineuse, la toxicité chronique du Myrj 59, son éventuelle influence sur la répartition tissulaire et sur la liaison de l’amphotéricine aux protéines plasmatiques
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Citations
Tasset, C. (1991). Etude de formulations intraveineuses d’amphotericine B avec des agents tensioactifs dérivés ou non du cholesterol. https://hdl.handle.net/2078.5/111229