Le peptidoglycane (PG) est un constituant majeur de la paroi des bactéries à Gram positif. Ce polymère de chaînes de sucres reliées entre elles par des peptides entoure la cellule d'un sacculus protecteur. Structure dynamique, il permet à la bactérie de croître et de se diviser tout en assurant sa survie et le maintien de sa forme. La biosynthèse du PG est initiée dans le cytoplasme par la formation d'un précurseur soluble, qui est transporté à la face externe de la membrane plasmique où il est incorporé au PG par les PBPs ou "penicillin binding protein". Les PBPs collaborent avec des hydrolases du PG, qui permettent l'expansion du sacculus et assurent le remodelage ou "maturation" du polymère. La chaîne peptidique du précurseur du PG de Lactococcus lactis se termine par D-alanyl-D-alanine. Chez Lactobacillus plantarum, elle se termine par D-alanyl-D-lactate, ce qui confère la résistance à la vancomycine, un antibiotique dont la cible est la terminaison D-Ala-D-Ala. Au cours de ce travail, nous avons étudié la flexibilité de la synthèse du PG vis à vis de la nature du dernier résidu du précurseur chez ces deux espèces. La stratégie mise en uvre consistait à produire des précurseurs se terminant par D-Ala chez L. plantarum et par D-Lac chez L. lactis. Chez L. plantarum, nous avons mis en évidence la présence d'une D-Ala-D-Ala dipeptidase intervenant dans la sélectivité de l'incorporation du D-Lac dans le précurseur. Nos résultats indiquent également que le précurseur se terminant par D-Ala n'est pas un substrat optimal pour la synthèse du PG. Chez L. lactis, la modification du précurseur mène à des altérations importantes de la composition biochimique du PG et de la morphologie. Ceci suggère que le précurseur modifié interfère avec l'activité des PBPs et/ou des hydrolases du PG. Nos résultats démontrent que malgré un certain niveau de flexibilité de la machinerie de synthèse du PG, la nature du précurseur joue un rôle clef dans la biosynthèse du PG et dans la morphogenèse.